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Opal/TSA 多標記染色技術--——多標記免疫熒光的新世界!

活動品牌:億鳴復興|多標染色 | 有效期:2019.02.28-2019.05.27

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免疫組織化學染色及成像分析是研究組織形態和組織原位抗原表達不可或缺的檢測技術,廣泛應用于臨床病理診斷和醫學及生物學研究的各個領域。組織切片樣本中蘊含著豐富的信息,但是受制于傳統單標記免疫組織化學染色方法的限制,通常只能對組織中的一到兩種抗原進行染色分析,最多3種抗原,而且定量結果的判讀往往依賴于肉眼觀測,缺乏客觀標準。隨著蛋白組學的發展,對現代組織學分析提出了更高的要求,例如不同的蛋白共表達和共定位分析、低豐度分子的檢測、異質性分析、細胞表型統計乃至復雜組織微環境的描繪等,都需要在同一張組織切片樣本上同時檢測多種靶標分子。這對于理解組織微環境中各種細胞間的關系,推演信號通路上下游蛋白表達的關系,制定臨床診斷和治療方案都有著非常重要的意義。



然而,在2017年,突然出現一種新技術——多光譜組織成像技術應用在幾十篇SCI文章中,利用這種新技術闡述了腫瘤免疫、腫瘤微環境中各種機制。

下面給大家列出一些例子:


1 乳腺癌中CD8/Ki67/GZMB的定位和定量

2 肝癌組織中淋巴細胞的區分

Chunhong et al., Cell,2017






3多光譜組織成像技術在人胰腺癌中分析細胞獨特組成
Julienne et al., nature communication,2017




4 結腸癌中IL-33/CD31的定位和定量

Min et al., Cancer reserch,2017

上述四個例子只是2017年發表的幾十篇文章中的小部分,那么為什么這個技術突然這么熱火呢?下面給大家簡單降解一下這個技術的優勢。

多光譜組織成像技術的優勢重點在三部分,首先第一部分是染色方面:這是一種基于酪胺信號放大(TSA)技術衍生而來的多標記免疫熒光染色方法,能夠在同一組織切片樣本上復染7 種以上抗原并進行區別標記,不限一抗的種屬來源限制,因此只要您想在某個組織上探究某個蛋白的定位和定量,只需要有此抗原的相應抗體即可。若您想具體了解染色機理,可以聯系我們北京億鳴復興生物科技有限公司。

優勢的第二個部分是采集圖像:新技術采用光譜照相機,多光譜成像是檢測復雜染色樣品信號的有效手段,不僅能對混雜的各色信號進行識別,而且能夠去除自發熒光的干擾。實現多光譜組織成像系統。

最后的優勢是一個最新的軟件分析數據。inForm是已獲專利的自動圖像分析軟件,可以準確地定置組織切片中的生物標記物。能夠在單細胞水平進行免疫組化、免疫熒光和原位RNA雜交分析,而且允許在單個和多重實驗中對微弱的光譜重受標記物進行分離和測定。inForm使用已獲專利的"自學習"算法自動對特定組織類型進行檢測、分割,該軟件就像一名專業病理學家,通過鑒別組織的形態模式來找到特定的組織類型。主要特點是定量分析組織切片和組織芯片中生物標物的表達量;分離重疊的微弱標記信號;對H&E、IHC染色和免疫熒光標記的固定組織進行細胞分析;借助"自學習"軟件算法自動識別特定的組織類型。配合光譜成像技術和定量分析軟件,能夠將組織中蘊含的豐富信息準確的呈現出來。這套流程化的分析方案為臨床診斷和基礎科研提供了更高精度和更可靠的組織學數據,將免疫組織化學分析的技術水平提升到一個新的高度。

技術對比

Opal/TSA多標記免疫熒光

傳統免疫熒光

靶點數目

不受限制(最多可同時染色7種)

一般標記3種(含DAPI

一抗種類

同一種屬的不同抗體即可滿足要求

不同種屬的不同抗體

二抗種類

連接辣根過氧化物酶的同種屬二抗

連接熒光探針的不同種屬二抗

染色策略

任何樣本無需任何染色策略,簡單的重復前一步的染色過程,樣本/靶點的差異不影響染色過程,使用簡單方便

樣本抗原的空間位置的差異,需要設計復雜的染色策略。樣本/靶點的差異導致染色策略的差異,染色過程復雜、多變

染色效果

高染色分辨率和染色特異性,信號強度強,淬滅時間更長,無背景影響,各靶點的信噪比大大提高,尤其適合組織基于單細胞的定量分析

亮度較弱,容易淬滅,各種抗體間存在互相影響,背景較高,對基于單細胞的定量分析不利

應用范圍

二抗具備通用性,因此實驗室中所有的研究領域均可使用

二抗不具備通用性,實驗室中應用領域受到局限



靠譜
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